反應(yīng)條件:
37℃撫育 (30min-2h),反應(yīng)時(shí)間過久會(huì)增加假陽性幾率,建議使用PCR儀或金屬浴
3.結(jié)果檢測(cè)
(1)取樣品20 μL加入5 μL的5X SDS-PAGE Sample Loading Buffer(含DTT),加熱樣品95℃ 5 min,進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析;
(2)選擇E3 Ubiquitin Ligase、泛素、Substrate抗體進(jìn)行Western-blot分析。
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